一般實(shí)驗(yàn)室在確定培養(yǎng)基種類(lèi)后，還會(huì)遇到培養(yǎng)基有不同分型的情況。那么對(duì)于經(jīng)典培養(yǎng)基中不同成分的作用及選擇原則又是什么呢？請(qǐng)往下看 ～

1.葡萄糖（Glucose）：

作用：細(xì)胞生長(zhǎng)所需的主要能量來(lái)源。

? 如何選擇不同葡萄糖含量的培養(yǎng)基？

最初的 DMEM 中，葡萄糖濃度為 1 g/L，現(xiàn)在稱(chēng)其為低糖型 DMEM，適合培養(yǎng)多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞；

高糖型 DMEM 中的葡萄糖濃度為 4.5 g/L，適合生長(zhǎng)速度快，附著性較差的腫瘤細(xì)胞；

使用無(wú)糖培養(yǎng)基的主要目的是，通過(guò)控制細(xì)胞的能量來(lái)源，研究細(xì)胞的代謝過(guò)程或葡萄糖利用效率

2.HEPES：

作用：pH 緩沖劑。

是一種氫離子緩沖劑，其作用不依賴(lài)于 CO2；

在一定范圍內(nèi)對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性作用，能較長(zhǎng)時(shí)間控制恒定的 pH 范圍，保證細(xì)胞良好生長(zhǎng)；

部分細(xì)胞對(duì)酸堿度的變化非常敏感，建議使用 HEPES；

根據(jù)需要，非必需。

3.L-谷氨酰胺（L-glutamine）：

作用：L-谷氨酰胺是一種氨基酸，細(xì)胞的重要能量來(lái)源，參與蛋白質(zhì)的合成，也為合成核酸提供碳源。

? 存在的不足：

L-谷氨酰胺不穩(wěn)定，在中性的水溶液中會(huì)自發(fā)降解；

降解產(chǎn)物氨對(duì)細(xì)胞有毒性；

對(duì)氨敏感的細(xì)胞（如干細(xì)胞和原代細(xì)胞等）或培養(yǎng)環(huán)境（高密度反應(yīng)器，無(wú)補(bǔ)料的長(zhǎng)期培養(yǎng)）不推薦含 L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基。

? 解決方案：

選擇不含谷氨酰胺的培養(yǎng)基，在使用前再添加 L-谷氨酰胺，并盡快用完；

選擇穩(wěn)定的谷氨酰胺替代物，如 glutaGRO。

4.酚紅（Phenol red）：

作用：pH 值的指示劑（中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色）。

? 何時(shí)選擇不含酚紅的培養(yǎng)基？

培養(yǎng)干細(xì)胞或細(xì)胞克隆時(shí)傾向于不加酚紅；

酚紅可以模擬固醇類(lèi)激素的作用（特別是雌激素）；

酚紅的顏色會(huì)干擾流式檢測(cè)，不建議使用含酚紅的培養(yǎng)基制備細(xì)胞樣品（通常用 PBS）。

5.碳酸氫鈉（Sodium bicarbonate）：

作用：pH 緩沖劑。

pH 6.8~7.8 為細(xì)胞生長(zhǎng)的最佳 pH 條件；

多數(shù)培養(yǎng)基利用碳酸氫鈉進(jìn)行緩沖；

碳酸氫鈉的緩沖需要 CO2；

1.高碳酸氫鈉(1.5~3.7 g/L)需要 5~10% CO2 培養(yǎng)；

2.低碳酸氫鈉（0.35 g/L）不需要 CO2 培養(yǎng)。

干粉培養(yǎng)基在配制時(shí)需要單獨(dú)添加。

6.丙酮酸鈉（Sodium pyruvate）：

作用：能量來(lái)源。

丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源；

葡萄糖不足的時(shí)候，細(xì)胞可以代謝丙酮酸鈉；

保證細(xì)胞更好地生長(zhǎng)；

根據(jù)需要，非必需組分。